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维护气压力,为了避免呈现微漏,炉内维护气应坚持必定的正压,如果是氢气维护气,一般要求20kBar以上。退火气氛:一般都是选用纯氢作为退火气氛,气氛纯度建议是99.99%以上,如果气氛中另一部分是惰性气体的话,纯度也可以低一点,可是肯定不能含有过多氧气、水汽。退火温度(退火温度为引物,和模板结合时候的温度参数,当50%的引物和互补序列,表现为双链DNA分子时的温度,它是影响PCR特异性的较重要要素。在抱负状况下,退火温度足够低,以确保引物同意图序列有用退火,一起还要足够高,以削减非特异性结合。合理的退火温度从55℃到70℃。退火温度一般设定比引物的Tm低5℃。大型法兰处理一般是采纳固溶热处理。
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